Elektroforeza: çfarë është, për çfarë shërben dhe si bëhet

Përmbajtje

• Për çfarë shërben
• Si bëhet
• Llojet e elektroforezës
• 1. Elektroforeza e hemoglobines
• 2. Elektroforeza e proteinave

Elektroforeza është një teknikë laboratorike e kryer me objektivin e ndarjes së molekulave sipas madhësisë së tyre dhe ngarkesës elektrike në mënyrë që të bëhet diagnostikimi i sëmundjeve, të verifikohet shprehja e proteinave ose të identifikohen mikroorganizmat.

Elektroforeza është një procedurë e thjeshtë dhe me kosto të ulët, që përdoret në rutinën laboratorike dhe në projekte kërkimore. Sipas qëllimit të elektroforezës, mund të jetë e nevojshme të kryhen teste dhe provime të tjera për të arritur një diagnozë, për shembull.

Për çfarë shërben

Elektroforeza mund të kryhet për qëllime të ndryshme, si në projekte kërkimore, ashtu edhe në diagnozë, pasi që është një teknikë e thjeshtë dhe me kosto të ulët.Kështu, elektroforeza mund të kryhet për:

• Identifikoni viruset, kërpudhat, bakteret dhe parazitët, me këtë aplikim që është më i zakonshëm në projektet kërkimore;
• Testi i atësisë;
• Kontrolloni shprehjen e proteinave;
• Identifikoni mutacionet, duke qenë të dobishëm në diagnozën e leukemisë, për shembull;
• Analizoni llojet e hemoglobinës qarkulluese, duke qenë e dobishme në diagnozën e anemisë së qelizave drapër;
• Vlerësoni sasinë e proteinave të pranishme në gjak.

Sipas qëllimit të elektroforezës, mund të jetë e nevojshme të kryhen teste të tjera plotësuese për mjekun për të përfunduar diagnozën.

Si bëhet

Për të kryer elektroforezë, kërkohet xheli, i cili mund të jetë poliakrilamid ose agarozë në varësi të qëllimit, zbutësit dhe kazanit të elektroforezës, shënuesit të peshës molekulare dhe një bojë fluoreshente, përveç një pajisje të dritës UV ose LED, e njohur gjithashtu si një ndriçues.

Pas përgatitjes së xhelit, duhet të vendoset një objekt specifik në mënyrë që puset të bëhen në xhel, i quajtur gjerësisht krehër, dhe le të vendoset xheli. Kur xheli është gati, thjesht vendosni substancat në puse. Për këtë, një shënues i peshës molekulare duhet të vendoset në një nga pusetat, një kontroll pozitiv, i cili është substanca që dihet se çfarë është, një kontroll negativ, i cili garanton vlefshmërinë e reaksionit dhe mostrat që do të analizohen. Të gjithë mostrat duhet të përzihen me një bojë fluoreshente, pasi në këtë mënyrë është e mundur të vizualizohen brezat në transiluminator.

Xheli me mostrat duhet të vendoset në kazanin elektroforezë, i cili përmban solucionin specifik tampon, dhe më pas pajisja ndizet në mënyrë që të ketë rrymë elektrike dhe, rrjedhimisht, diferencë potenciale, e cila është e rëndësishme për grimcat e ndarjes sipas tyre ngarkesa dhe madhësia. Koha e funksionimit elektroforetik ndryshon në përputhje me objektivin e procedurës dhe mund të zgjasë deri në 1 orë.

Pas kohës së specifikuar, është e mundur të shikoni rezultatin e rrjedhës elektroforetike përmes transilluminatorit. Kur xheli vendoset nën dritën UV ose LED, është e mundur të vizualizohet modeli i lidhjes: sa më e madhe molekula, aq më e vogël është migrimi i saj, duke iu afruar pusit, ndërsa sa më e lehtë molekula, aq më i madh është potenciali migrues.

Që reagimi të vërtetohet, bandat e kontrollit pozitiv duhet të vizualizohen dhe asgjë nuk duhet të vizualizohet në kontrollin negativ, pasi përndryshe është një tregues se ka pasur ndotje, dhe i gjithë procesi duhet të përsëritet.

Llojet e elektroforezës

Elektroforeza mund të kryhet për qëllime të ndryshme dhe, sipas qëllimit të saj, mund të përdoren disa lloje xheli, më i zakonshmi është poliakrilamidi dhe agaroza.

Elektroforeza për të identifikuar mikroorganizmat është më e zakonshme të kryhet në laboratorë kërkimi, megjithatë, për qëllime diagnostikuese, elektroforeza mund të përdoret për të identifikuar sëmundjet hematologjike dhe sëmundjet që evoluojnë me rritjen e sasisë së proteinave, duke qenë llojet kryesore të elektroforezës:

1. Elektroforeza e hemoglobines

Elektroforeza e hemoglobinës është një teknikë laboratorike e kryer për të identifikuar llojet e ndryshme të hemoglobinës që qarkullojnë në gjak, duke bërë të mundur identifikimin e pranisë së sëmundjeve që lidhen me sintezën e hemoglobinës. Lloji i hemoglobinës identifikohet me anë të elektroforezës në një pH specifik, idealisht midis 8.0 dhe 9.0, me një model bandash që mund të krahasohet me modelin normal, duke lejuar identifikimin e hemoglobinave jonormale.

Për çfarë është bërë: Elektroforeza e hemoglobinës kryhet për të hetuar dhe diagnostikuar sëmundjet që lidhen me sintezën e hemoglobinës, të tilla si anemia e qelizave drapër dhe sëmundja e hemoglobinës C, përveç që është e dobishme në diferencimin e talasemisë. Mësoni si të interpretoni elektroforezën e hemoglobinës.

2. Elektroforeza e proteinave

Elektroforeza e proteinave është një provim i kërkuar nga mjeku për të vlerësuar sasinë e proteinave që qarkullojnë në gjak dhe, kështu, për të identifikuar sëmundjet. Ky ekzaminim bëhet nga një mostër gjaku, e cila centrifugohet për të marrë plazmën, pjesën e gjakut që përbëhet, midis substancave të tjera, nga proteina.

Pas elektroforezës, një model i brezave mund të vizualizohet dhe, më pas, një grafik në të cilin tregohet sasia e secilës fraksion të proteinave, duke qenë themelore për diagnozën.

Për çfarë është bërë: Elektroforeza e proteinave lejon mjekun të hetojë shfaqjen e mielomës multiple, dehidratimin, cirrozën, inflamacionin, sëmundjen e mëlçisë, pankreatitin, lupusin dhe hipertensionin sipas modelit të brezit dhe grafikut të paraqitur në raportin e ekzaminimit.

Kuptoni se si bëhet dhe si të kuptoni rezultatin e elektroforezës së proteinave.